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NEC-LUC人食管癌細胞-熒光素酶標記
特性:
安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下*好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
NEC-LUC人食管癌細胞-熒光素酶標記
其他服務項目:
服務領域 | 服務內(nèi)容 |
分子生物學實驗 | 熒光定量PCR、慢病毒/腺病毒包裝、化學合成序列、全基因合成、原位雜交、甲基化 |
細胞生物學實驗 | 細胞分離和鑒定、細胞耐藥株構建、細胞共培養(yǎng)、外泌體提取、穩(wěn)轉株的構建 |
蛋白相關形態(tài)實驗 | 蛋白表達檢測:Western blot;免疫組化 (IHC)、免疫組化芯片、免疫熒光(IF)、激光共聚焦拍片、 Elisa檢測 |
動物模型實驗 | 成瘤實驗:裸鼠成瘤實驗、原位接種成瘤實驗 |
DNA/RNA/蛋白相互作用研究實驗 | 雙熒光素酶驗證實驗、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、染色質免疫共沉淀技術(ChIP)、RIP技術(RNA結合蛋白免疫沉淀)、EMSA實驗、RNA pull down |
高通量分析實驗 | 高通量測序、蛋白質組學 |