Edu細胞增殖檢測
EdU可以在DNA復制的時候摻入到新合成的DNA鏈中,通過一個“Click”反應,把熒光基團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣我們就能通過檢測熒光而知道細胞的增殖情況了。
操作步驟
1. 細胞培養(yǎng):取對數(shù)生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常生長階段
2. 藥物處理:根據(jù)實驗需要進行各種藥物處理
3. EdU標記:用細胞培養(yǎng)基按1000:1的比例稀釋EdU溶液 (試劑A),制備適量50μM EdU培養(yǎng)基;
注:1)EdU濃度與孵育時間相關,短時間孵育(<2h)宜采用高濃度(10~50 μM),長時間孵育(>24h)宜采用低濃度 (1~10μM);
a.如果需配置10μM EdU培養(yǎng)基,需調(diào)整為5000:1稀釋比例;
b.配置好的培養(yǎng)基的保存時間取決于培養(yǎng)基的性質。
4. 細胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲取及分析
客戶提供
1.提供新鮮的肝素或者EDTA抗凝的外周血;
2.提供新鮮的培養(yǎng)細胞,提供新鮮組織,需要實驗室制備成單細胞懸液。
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Edu細胞增殖檢測/細胞增殖實驗
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