熒光定量PCR就是測定樣品中某個模板的起始量ct值。但在實(shí)際操作過程中，由于之前DNA提等步驟，各個步驟存在不同的效率，在實(shí)驗(yàn)過程中也存在加樣誤差、各孔溫度差等影響，每個樣本的Ct值并無法真實(shí)反映每個樣品中初始模版的絕對量，這就使得我們無法對不同處理的樣本進(jìn)行分析評價。因此，我們需要一個參考標(biāo)準(zhǔn)對每一個樣本進(jìn)行校正，排除其他無關(guān)因素帶來的的影響。
 

　　普通PCR儀與熒光定量PCR有什么差異?
 

　　普通的PCR儀比熒光定量PCR儀少了熒光信號采集系統(tǒng)和計算機(jī)分析處理系統(tǒng)，普通的PCR儀是做定性分析和擴(kuò)增基因片段，而實(shí)時熒光定量PCR儀主要是用來定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的，定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作，反之就可以了，況且這樣代價太大了，一般的實(shí)驗(yàn)室都不允許這樣做的?？傊畠烧叩墓δ懿荒芑ハ嗳〈穸葌鞲衅魈筋^,不銹鋼電熱管PT100傳感器,鑄鋁加熱器,加熱圈流體電磁閥。
 

　　普通的基因擴(kuò)增儀只能夠定性地分析是否存在目標(biāo)片段。但是價格要低很多，而且運(yùn)行成本也要低很多。不過不能直接得到擴(kuò)增結(jié)果，還需要做電泳檢測。實(shí)際中檢測遺傳疾病，品種分子標(biāo)記篩選，甚至親自鑒定等都可以由普通PCR儀完成。
 

　　但是，某些需要定量的實(shí)驗(yàn)就必須用到實(shí)時定量PCR了。比如檢測某些病原物的數(shù)量(血液乙肝病毒復(fù)制程度)，特定基因的表達(dá)量(比如結(jié)合反轉(zhuǎn)錄做的RNA定量分析)，某些基因在染色體組中拷貝數(shù)等等。熒光定量PRC一般不需要對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析，操作相對簡單些，但是耗材實(shí)在是貴。
 

　　簡單來說，看有沒有用普通PCR儀，看有多少用熒光定量PCR?；驍U(kuò)增儀只能擴(kuò)增，不能檢測，便宜。熒光定量PCR儀除了擴(kuò)增，還能在擴(kuò)增的同時檢測DNA發(fā)出的熒光信號，試劑和儀器都更貴。